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首頁技術服務工藝技術大腸桿菌發酵經驗總結及注意事項

大腸桿菌發酵經驗總結及注意事項

發布時間:2024-08-28 瀏覽次數:3815

首先,補料速率與比生長速率直接影響著乙酸的生成速率和積累量(主要是補料速率與比生長速率影響發酵液中的殘糖量,進而影響),所以適當的控制補料速率和比生長速率,對于控制乙酸的量有很好的效果。


其次,必須要保證充足的溶氧,并嚴格控制pH值,而且補酸堿的速率盡量緩和,不能太快;溫度對于蛋白的表達也有很重要的影響,較低的發酵溫度下所生產出的蛋白大多是有活性的,而較高的發酵溫度下產生的蛋白大多一包涵體形式存在。


第三,選取合理的誘導時間非常重要,一般的誘導時間選在指數生長后期,而且誘導時的比生長速率最好能控制在0.2之內,選在此時誘導,1.將菌體的快速生長期與蛋白合成期分開,使這兩個階段互不影響,有利于蛋白的高表達;2.已經得到了大量的菌體,而且菌體的生物量基本接近穩定,不論是從動力學角度,還是能耗,物料成本方面,都比較合理。


第四,補料過程中的碳氮比也很重要。若氮源過高,會使菌體生長過于旺盛,pH偏高,不利于代謝產物的積累,氮源不足,則菌體繁殖量少從而影響產量;碳源過多,則容易刑場較低的pH,抑制菌體生長,碳源不足,則容易引起菌體的衰老和自溶。另外,碳氮比不當還會引起菌體按比例的吸收營養物質,從而直接影響菌體的生長和產物的合成。
根據自己的經驗,一般情況下,對于一個穩定的發酵工藝下,如果總是在固定的發酵時間段出現溶菌現象,而且能排除噬菌體和染菌的可能性后,那就可能是因為碳氮比不合理造成的??梢赃m當調整碳氮比。

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